Fecundația in vitro, clonarea, transgeneza

Introducere

Reproducția asistată (așa cum este denumită în termenii de specialitate în limba engleză) a ajuns să reprezinte, atât prin trecerea timpului cât și datorită minții iscoditoare a omului, o multitudine de tehnici care au drept scop suprem crearea unor noi vieți. Contribuția omului este covârșitoare și copleșitoare dacă este să ne amintim că în secolul trecut au fost puse bazele însămânțărilor artificiale, ale embriotransferului, IVF, ICSI, clonării.

Fecundația este un proces biologic complex care constă în fuziunea unei ovocite mature cu un spermatozoid și formarea unui embrion. La mamifere, fecundația in vivo se realizează în partea superioară a oviductului. Prin crearea in vitro a unor condiții asemănătoare, este posibil realizarea procesului de fecundație și în afara organismului animal sau uman. Primele reușite ale tehnologiilor de reproducție umană asistată (ART) au survenit ca o consecință directă a realizărilor de la animalele de laborator (șoarece, șobolan, hamster, iepure) sau de fermă (vacă, oaie). Aceste specii sunt folosite în continuare ca model pentru dezvoltarea și perfecționarea multor metode utilizate în ART (Keel și colab., 2000).

2. Fecundația in vitro ( In Vitro Fertilization)

Se bazează pe producția de embrioni utilizați pentru cercetare, pentru tratarea infertilității la oameni și animale, pentru creșterea productivității la animalele de fermă și pentru protejarea speciilor periclitate

Pentru majoritatea speciilor, protocoalele de IVF sunt disponibile și oferă cantități mari și suficiente de ovule fertilizate, ducând la o producție de embrioni viabili care se pot dezvolta într-un produs de concepție normal după transferul la femelele receptoare.

Originile fertilizării in vitro se regăsesc încă din anul 1878.

- primele studii care atestă succesul fertilizării in vitro la om s-au publicat în anul 1969 - IVF cu spermatozoizi capacitați

- în prezent se încearcă punerea la punct a unui protocol IVF a ovocitelor bovine și umane care să ducă la obținerea de embrioni viabili ce vor putea fi transferați la femelele

receptoare

Aplicații ale fecundației in vitro

Creșterea numărului de produși valoroși de la o anumită femelă sau de la un anumit cuplu reprezintă și în cazul fecundației in vitro principala aplicație,

O altă aplicație este obținerea de produși de la femele impubere în vederea scurtării intervalului dintre generații,

Obținerea de produși de la masculi cu un anumit grad de infertilitate reprezintă o aplicație destinată în primul rând (dar nu exclusiv) speciei umane,

Aplicațiile fecundației in vitro se regăsesc și în cazul micromanipulării gameților. Intervențiile genetice pentru clonare (SCNT - Somatic Cell Nuclear Transfer), transgeneză și editare genetică, se realizează în timpul sau imediat după fecundație.

În urma aplicării tehnicilor genetice, embrionul nou format (transformat) se cultivă in vitro pentru a atinge un stadiu de dezvoltare optim, apoi va fi transferat femelelor receptoare. Perfecționarea tehnicilor de clonare, transgeneză și editare genetică, a creat cadrul tehnic pentru apariția primelor firme care să ofere servicii de producer a organismelor animale modificate genetic la nivel comercial. Rămâne de văzut cum va fi gestionată la nivelul publicului larg componenta bioetică și de siguranță alimentară în cazul consumului de produse provenite de la aceste animale.

Fecundația in vitro are aplicabilitate și în cazul conservării biodiversității animale sub forma băncilor de ovocite. Datorită dificultăților întâmpinate în crioconservarea cu succes a ovocitelor (imature sau mature), băncile de ovocite sunt mai puțin importante decât cele de spermă, respectiv de embrioni.

Protocol FIV :

tehnica de recoltare a ovocitelor

aprecierea morfologică a ovocitelor recoltate (clase de calitate)

metodele de cultivare pentru maturarea ovocitelor (medii de cultura și condiții) evaluare post cultivare

capacitarea spermatozoizilor (medii+ tehnici)

fertilizarea ovocitelor ( condiții)

cultivarea (medii de cultură+microclimat)

transferul (receptoare)