Extras din laborator
Produsul patologic
- în tuberculoza pulmonară – spută, aspirat bronsic, lichid pleural, spălătură gastrică
- în tuberculoza renală – urina (toată cantitatea de urină emisă dimineaţa)
- în tuberculoza genitală – secreţie vaginală, cervicală, spermă, secreţie prostatică
- în tuberculoza articulară, osoasă – lichid sinovial, puroi
- în tuberculoza ganglionară – material din puncţie ganglionară, puroi
- în meningita tuberculoasă – LCR
- în tuberculoza miliară se recomandă şi hemocultura
Recoltarea:
- În suspiciunea de tuberculoză pulmonară - recoltarea a trei probe de spută succesive, obţinute dimineaţa
Prelucrarea produselor patologice:
- eliminarea sau reducerea numerică a celorlalte microganisme în produsele cu floră de asociaţie, prin decontaminarea acestora;
- eliberarea mycobacteriilor aflate intracelular sau cuprinse în mase de mucus este necesară în special pentru spută ( fluidificarea sputei);
- concentrarea produselor paucibacilare, în vederea examinării microscopice.
Examen microscopic:
- frotiu colorat Ziehl-Neelsen
- bacili lungi si subţiri, usor încurbaţi, , imobili, nesporulaţi, neîncapsulaţi, rosii (acido-alcolorezistenţi), fondul preparatului fiind albastru
- prezenţa celulelor epiteliale şi a macrofagelor de la nivelul tractului respirator, a leucocitelor- reacţia inflamatorie
Izolare
- pe mediul Lowenstein-Jensen - se toarnă în tuburi în pantă, iar după însămânţare tuburile se parafinează pentru a împiedica deshidratarea pe perioada incubării
- incubare la 37°C, 5-10% CO2 în prima săptămână, până la 90 de zile
Identificare
- caractere de cultură
- Crestere eugonică ( M. Tuberculosis, M. africanum)
- creste în 2-6 săptămâni
- colonii de tip R, neregulate, uscate, conopidiforme, culoare alb-gălbuie
- Creştere disgonică( M. Bovis), colonii mici, de tip S, alb-gălbui, care apar după 4-8 săptămâni
- Mycobacteriile saprofite- creştere rapidă , după 3-7 zile formează colonii mici, de tip S, rareori de tip R sau cu aspect intermediar
- Identificarea biochimică :
- testul catalazei la 680 C,
- testul producerii de niacină,
- reducerea nitratului,
- hidroliza Tween 80
- susceptibilitatea la PAS ( acidul p-amino-salicilic)
- toleranţa la NaCl 5%.
- Alte metode de identificare: metoda PCR
- antibiograma
- Antibiogramele pe mediu solid, indiferent de metodă, presupun compararea dezvoltării bacililor inoculaţi pe un mediu martor fără antibiotice cu cea pe medii cu antibiotice incluse.
- Antibiograma directă se realizează prin însămânţarea unui inocul omogenizat şi decontaminat din produsul patologic bogat în bacili. Rezultatele -în 4 săptămîni şi populaţia de bacili testată este reprezentativă pentru situaţia in vivo
- Antibiograma indirectă - testarea unui inocul standardizat din cultura obţinută în prealabil. Rezultatele - după 10 săptămâni;eficientă pentru produsele sărace în bacili;standardizarea este mai bună. Există mai multe metode: metoda concentraţiilor absolute, metoda proporţiilor, metoda raportului rezistenţelor
- Diagnosticul serologic - determinarea anticorpilor de tip Ig G şi Ig A anti-M( ELISA)
- Intradermoreacţia la tuberculoproteine ( IDR la PPD)
- se inoculează intradermic tuberculină purificată (PPD, 2 unităţi)
- citirea reacţiei se face după 72h
- este o IDR alergică:
- Anergicii ( IDR ≤ 9mm) se consideră neinfectaţi.
- Alergicii ( ≥ 10 mm în absenţa cicatricei vaccinale şi ≥ 15 mm în prezenţa cicatricei vaccinale ) sunt controlaţi radiologic.
- induraţii locale.
- reacţia se interpretează în funcţie de mărimea si intensitatea induraţiei
Preview document
Conținut arhivă zip
- Diagnosticul Infectiilor Produse de Mycobacterium Tuberculosis.doc